一、细胞代谢概述
细胞代谢的特征是细胞内发生变化的总和,通过这些变化,能量与成分被用于各种生化过程。细胞呼吸是细胞新陈代谢的一种功能,它分解糖和其他单糖,并通过化学方式利用产生的ATP来产生能量。
细胞呼吸主要涉及三个步骤:糖酵解、柠檬酸循环和氧化磷酸化。这些过程共同形成各种构建快,用于创建许多必须分子,包括蛋白质、脂质、核酸和碳水化合物。废物的处理是细胞新陈代谢的一项重要功能,可以功能性地排泄潜在有毒成分,包括含氮化合物、磷酸盐和硫酸盐。由于细胞代谢与许多已知的生物途径(氨基酸代谢和运输、尿素循环、碳水化合物耐受性、糖原储存、脂肪酸氧化和线粒体活性等)相关,因此了解其在细胞生理学中的作用的重要性、疾病病理学和病因学不应被低估。
图1.TCA循环及其在脂质代谢中的作用概述。
二、方法与分析
最常见的检测和评估细胞代谢活动的技术之一是通过比色法或荧光法测定。这些测定针对已知相关途径的特定分析物,例如在鉴定糖酵解途径时可以选择检测葡萄糖、己糖激酶、丙酮酸、丙酮酸激酶,乳酸和糖原。在脂肪酸代谢中,甘油三酯、游离脂肪酸和焦磷酸盐可能是靶标。此外,在观察尿素代谢时可以选择尿素、谷氨酸或L-精氨酸,并且ATP,NAD,NADH,NADP或NADPH(或其组合)可以针对总体代谢活性。这些检测方法可以作为试剂盒在市场上买到,虽然每种方法的技术规格略有不同,但是每种方法的许多步骤是相似的。
表一.用于测量ATP活性、形成或消耗的生化测定。
表二.NAD/NADH和NADP/NADPH检测比较