人Ⅰ型胶原吡啶交联终肽(ICTP)酶联免疫分析 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中Ⅰ型胶原吡啶交联终肽(ICTP)的含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人Ⅰ型胶原吡啶交联终肽(ICTP)水平。用纯化的人Ⅰ型胶原吡啶交联终肽(ICTP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入ICTP,再与HRP标记的Ⅰ型胶原吡啶交联终肽(ICTP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的Ⅰ型胶原吡啶交联终肽(ICTP)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人Ⅰ型胶原吡啶交联终肽(ICTP)浓度。 试剂盒组成:
试剂盒组成 48孔配置 96孔配置 保存 说明书 1份 1份 封板膜 2片(48) 2片(96) 密封袋 1个 1个 酶标包被板 1×48 1×96 2 标准品:9μg/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶 2 酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2 样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2 显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2 显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2 终止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2 浓缩洗涤液 (20ml×20倍)×1瓶 (20ml×30倍)×1瓶 2
样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
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