摘要:近期,一篇发表在《Nature Protocols》的文章描述了如何培养离体的成年斑马鱼心脏组织,并将其应用于心外膜组织再生研究和心脏疾病的治疗靶点识别。不同于其他将斑马鱼心外膜细胞分离培养的方法,此处是在一个完整的心脏表面培养心外膜细胞,因此更符合体内的细胞行为,是心脏再生体系研究一个很好的补充和延伸。
斑马鱼之所以能被用来研究不同类型损伤导致的心脏组织缺失或损坏,是因为斑马鱼的心脏在受损后能通过心肌细胞的增殖再生而得到恢复,这就为心脏组织再生研究提供了一个非常有价值的系统模型。其中对心外膜的研究更是广受欢迎,因为无论是在斑马鱼还是在哺乳动物上的研究都已经证明了心外膜在心脏再生中的价值。
文章中描述的这个体外移植系统(下图为整个过程的概览),不仅能够维持几个星期的活性,更能保持大部分的心脏形态和收缩功能。利用这种方法和分子遗传工具可以实时监控并报告成年斑马鱼心外膜组织的再生能力。此外,这种外植体培养系统还可适于组织移植和化学筛选。
之前的研究中,通过生成的转基因工具来破坏斑马鱼的心外膜后发现,心外膜是受损心脏恢复正常所必须的。而在该体外外植体培养系统的帮助下,研究员们意外地发现心外膜本身在受损后也会再生(下图)。此系统在心外膜细胞基因调控,增殖,迁移和整体再生的细胞和分子机制研究中有极大的优势。
此外,该系统还适用于原位杂交中的基因表达检测、组织与组织相互作用研究等。外植体培养体系的一个明显的应用是化学筛选:例如,在心脏表面上测试数百或数千的化合物对心外膜细胞行为的影响。