Hey小伙伴们,今天我们来聊聊细胞碎片的那些事儿,快拿起小本本记好啦!
细胞碎片长什么样,如何和污染区分?
细胞经过运输后,部分细胞皱缩、脱落比较明显,脱落的细胞部分残骸就会保留在原地,高倍镜下观察就比较脏,脱落的细胞同时会产生凋亡小体附着在贴壁细胞表面和液体里。高倍镜下观察细胞碎片、分泌物就尤其多,形成大小不一的黑色圆点,或不规则形状,在原地震动,布朗运动等情况。
那这个时候有人就来质疑,细胞是不是污染了,细胞状态差需要怎么调整呢?
污染
1、当你怀疑你的细胞到货就污染时,你可以使用一个6孔板取2ml或小培养瓶T12.5添加4ml,T25瓶添加5ml,取细胞培养液进行空培养2-4天。
2、当培养基变浑浊、快速游动,快速转圈或相对液体静止、圆球状或杆状,形态非常规则、黑色点状分布均匀等情况时,是污染。
碎片
3、同理如果黑点不增值,大小不均匀,高倍镜下原地震动,那不用担心,这是细胞碎片,只要培养基营养足够,传代1-2次后碎片会减少很多。
碎片是怎么产生的呢?
1.细胞悬浮液处理不当:就像我们摇晃饮料一样,如果太用力,泡沫和沉淀物就会增多。细胞悬浮液也是,如果抖动或振荡得太猛,细胞就会“晕头转向”,一不小心就变成碎片了。
2.细胞密度过高:想象一下,如果一个房间里挤满了人,大家挤来挤去,摩擦自然就多了。细胞也是这样,密度太高,细胞间的“摩擦力”就会增加,碎片也就随之而来。
3.细胞本身就是碎片化的:有时候,细胞就像我们一样,如果生病了或者没活力了,就会慢慢衰弱,最终“离世”。细胞也是一样,一旦失去活力,就会自然死亡,变成碎片。
4.受到运输环境影响:细胞在运输过程中,就像是我们坐长途飞机,难免会感到不适。细胞也会发生应激反应,分泌活动增加,导致分泌蛋白增多。同时,路途中凋亡的细胞碎裂后,也会增加细胞碎片。
以上就是细胞碎片可能的几种原因啦,希望对你们有所帮助!在实验中遇到细胞碎片问题时,记得检查一下这些可能的原因哦~
如果你们有其他问题或者经验分享,也欢迎在评论区交流哦!
遇到细胞碎片不要惊慌!教你让细胞慢慢恢复
1.PBS洗涤法:就像给细胞洗澡一样,用PBS轻轻拍打培养瓶,让那些贴壁不牢的碎片和颗粒脱落,然后把它们冲走。这个方法简单又温和,不会伤害到我们的细胞宝宝哦!
2.消化+离心大法:消化细胞后,用低速离心,比如900-1000rpm,3分钟,然后弃去上清液,把细胞碎片甩掉。但要注意,这个方法可能会让一些细胞宝宝受伤,所以要温柔一点,别太粗暴哦!
3.控制胰酶消化时间:在处理细胞碎片时,记得控制胰酶消化时间,别吹打得太猛,这样可以减少细胞碎片的产生,保护细胞宝宝。
4.避免过度搅拌:在培养过程中,要避免搅拌过度,特别是在离心和重悬时,这样可以减少细胞碎片的产生,让细胞宝宝更安全。
5.控制细胞密度和培养时间:高密度和长时间的培养可能会导致细胞自发破裂,所以适当控制细胞密度和培养时间,可以让细胞宝宝更健康。
6.选择合适的培养基和条件:不同的细胞宝宝需要不同的家,所以要选择合适的培养基和条件,这样可以减少细胞碎片的产生,让细胞宝宝更舒适。