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威斯腾生物
单克隆抗体制备生物技术服务

单克隆抗体制备生物技术服务

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产品名称： 单克隆抗体制备生物技术服务

英文名称： Western Biotechnology Inc

产品编号：

产品价格： 欢迎来电详询023-65316016，023—65316556

产品产地： null

品牌商标： null

更新时间： 2023-07-31T09:56:51

使用范围： null

威斯腾生物
  • 联系人 : 张老师
  • 地址 : 重庆高新区生物医药研发产业园D栋
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  • 所在区域 : 重庆
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  • 邮箱 : western68@163..com
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单克隆抗体制备技术服务



单克隆抗体（单抗）应用淋巴细胞杂交瘤技术将免疫动物的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，通过HAT筛选，ELISA抗体检测，有限稀释克隆化，选择出具有分泌抗体功能又能无限繁殖的来源于单一B细胞的杂交瘤细胞，并产生抗体，就是单克隆抗体。单抗的最大优势是它的特异性、均一性、高效性和无限供应性。在免疫学、医学、生物学等领域的基础研究和临床医学上，包括对疾病(包括癌症)的诊断、预防和治疗等方面，均显示出巨大的生命力。

实验步骤：
1. 每种抗原免疫5只Balb/c小鼠
2. 选取ELISA效价较高的小鼠，取脾细胞与SP2/0细胞融合
3. 进行2~4次克隆化及ELISA筛选，确保杂交瘤细胞分泌抗体的稳定性
4. 抗体亚类鉴定
5. 至少选择2株杂交瘤细胞的冻存，并免费提供一年的保种服务

单抗制备标准流程：
 
时间（天） 制备步骤 说明
1 初次免疫 每种抗原免疫5只Balb/c小鼠，抗原与弗氏完全佐剂
22 第二次免疫 抗原与弗氏不完全佐剂
43 第三次免疫 抗原与弗氏不完全佐剂
免疫一周后取血+ELISA检测效价
57 加强免疫 单独抗原
三天后采血(血清做阳性对照)，取脾
60 细胞融合 SP2/0骨髓瘤细胞与一只小鼠（ELISA效价较高）的脾细胞融合
70-100 HAT选择杂交瘤细胞 ELISA效价检测筛选阳性细胞克隆
    至少进行2~4次杂交瘤细胞的亚克隆，直至细胞上清的ELISA结果阳性
率达到100%，将完成细胞建株
115-120 亚类鉴定 对杂交瘤细胞株所分泌的抗体进行亚类测定
120 冻存细胞株 每种抗原提供2株杂交瘤细胞
121-140 制备腹水并纯化 接种细胞制备腹水、Protein A/G 纯化
150 最终提供 2株杂交瘤细胞和相应Protein A/G 纯化的单抗IgG，2~5mg/株
完整的技术服务报告
完整实验记录
 
抗体的应用：制备的抗体可能用于ELISA、WB、IHC、IP等实验。

客户需提供的材料及信息:
  • 客户需要提供2mg以上的纯化蛋白质，纯度≥90%(SDS-PAGE检测)，若带融合标签需说明并提供筛选蛋白
  • 如为多肽，客户要提供两种偶联不同蛋白质的多肽各4mg，未偶联多肽1mg，偶联多肽纯度≥85%
结果提供：
  • 实验报告    
  • 免疫前血清（20μl）         
  • 免疫后血清（20μl）
  • 抗体上清（至少3株,1ml/株）   
  • 杂交瘤细胞（3株）           
  • 抗体亚型
如需要纯化的客户增加如下结果：
纯化抗体（3株）(纯度≥90％,浓度≥1mg/ml,每株5mg）   免疫效价   抗体亲和力常数
 
相关说明：
A、免疫原可以为重组蛋白、天然蛋白、合成多肽、偶联小分子等。
B、客户需要承诺外的细胞株，每株价格为500元。
C、客户需要对承诺外的细胞株抗体进行纯化，价格为1500元/5mg（单独报价为1800元）。
D、如客户需要非IgG类的其他细胞株，每株价格500元，纯化费用500元/5mg（CAAS法纯化）
 
威斯腾生物服务流程




威斯腾生物服务项目

分子生物学检测蛋白质与免疫学动物实验
实时荧光定量PCR单克隆抗体制备帕金森疾病模型
免疫共沉淀（Co-IP）多克隆抗体制备抑郁症动物模型
ELISA（酶联免疫吸附法）技术Western-blot 实验服务脊髓损伤模型
生化指标检测蛋白双向电泳实验服务脑外损伤模型
双荧光素酶报告基因检测原核蛋白表达纯化骨神经损伤模型
染色质免疫共沉淀（ChIP）真核蛋白表达纯化心肌缺血模型
GST pull DownITRAQ定量蛋白质组学心力衰竭模型
SLAC蛋白组学肺动脉高血压动物模型
高血压模型
病毒包装实验课题整体外包粥样动脉硬化模型
过表达/干扰慢病毒包装纯化整体课题外包大脑中动脉阻塞模型
过表达/干扰腺病毒包装纯化细胞整体实验外包慢性之气管炎模型
逆转录病毒包装纯化动物整体实验外包过敏性哮喘模型
腺相关病毒包装纯化肺炎大鼠模型
肝炎-肝硬化-肝癌模型
蛋白芯片原代细胞培养肝纤维化模型
细胞因子芯片骨髓间充质干细胞培养胆结石模型
BioPlex悬浮芯片脂肪干细胞培养急性胰腺炎模型
生长因子芯片心肌成纤维细胞培养急性肾衰竭模型
炎症因子芯片软骨细胞培养体内血栓模型
血管生成因子芯片血管内皮细胞培养关节炎模型
凋亡因子芯片神经元细胞培养I型和II型糖尿病模型
趋化因子芯片内皮组细胞原代培养裸鼠成瘤
HuProt TM 20K人类蛋白组芯片基因编辑动物
电生理相关服务动物整体实验服务
膜片钳实验
细胞生物学检测高通量测序代谢组学
细胞原代培养mRNA测序气相色谱GC/MS
MTT检测LncRNA测序液相色谱LC/MS
细胞凋亡检测全基因组测序核磁共震NMR
细胞周期检测RNA-Seq测序
细胞克隆形成实验外显子测序影像学相关实验
Transwell细胞迁移/侵袭16s扩增子测序Micro-CT
流式分选Small RNA测序小动物活体成像
CCK8/XTT检测宏基因组测序核磁共振
台盼蓝检测细胞活性单细胞测序PET-CT
药物筛选细胞学实验circleRNA测序
细胞粘附性检测甲基化测序基因编辑动物
细胞划痕实验条件性敲除小鼠/大鼠
细胞生物学整体实验全基因敲除小鼠/大鼠
细胞成管实验
病理检测CRISPR/Cas9细胞敲除/敲入基因芯片
扫描电镜基因定点突变细胞系LncRNA芯片
透射电镜单基因敲除细胞系miRNA芯片
HE染色多基因敲除细胞系mRNA芯片
免疫组化目的基因敲入细胞系甲基化芯片（限人和小鼠来源样本）
Tunel（原位末端凋亡法）检测报告基因敲入细胞系SNP芯片（限人和小鼠来源样本）
激光共聚焦miRNA/LncRNA敲除细胞系
免疫荧光
Masson染色CRISPR/Cas9动物敲除/敲入科研设计指导&文章评估/润色
原位杂交基因敲除大鼠/小鼠科研文献论著翻译
荧光原位杂交基因敲入大鼠/小鼠论文翻译润色服务
特殊染色（PSA、茜素红、阿尔新蓝等）临床实验/科研实验设计方案指导
行为学检测药物筛选服务项目药效学评价
旷场实验高通量自动药物筛选平台抗肿瘤药物药效学评价
重复性刻板行为检测细胞高内涵药物筛选平台心血管系统药物药效学评价
动物跑台检测蛋白质组学靶标研发平台泌尿系统药物药效学评价
强迫游泳分子药理研究平台内分泌系统药物药效学评价
生物膜片钳药物筛选平台抗炎免疫药物药效学评价
常规药物体外筛选

【本平台合作项目】
分子生物学、细胞生物学、基因敲出/入、模式动物、SPF动物保种、病理学检测、免疫学检测、影像学检测、原代培养、细胞药筛、CRISPR/Cas9基因编辑、基因芯片、高通量测序、蛋白组学、代谢组学、高通量高内涵筛选、药效学评价、药理毒理学实验、慢病毒包装与稳转株建立、SiRNA与纳米载药、ChIP、CO-IP、生物信息学分析、知识产权服务！ 
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