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慢病毒表达服务

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产品名称: 慢病毒表达服务

英文名称: 慢病毒表达服务

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慢病毒表达服务

 


 
质量保证:可提供1E6 - 1E7 TU/ml原液或1E8 - 1E9 TU/ml浓缩液
去除了病毒的关键蛋白,对人体安全;属于复制缺陷型病毒,不会产生下一代病毒颗粒;已被改造为自身失活性,病毒转导并整合到细胞后不再具有产生具有包装能力的病毒基因组。可根据需要选择组织特异性或细胞特异性启动子

原理
慢病毒系统是理想的可以在多种细胞类型(如原代细胞、干细胞和非
分裂细胞)中实现可重复的稳定表达的基因表达工具。对于难转染的
细胞而言,采用病毒递送外源基因的方式是非常有效的选择。慢病毒
通过顺式作用元件将病毒运送到细胞核,并将要表达的基因序列整合
到细胞的基因组中。采用慢病毒可以得到持续稳定的高表达。采用慢
病毒系统进行高滴度的复制缺陷型慢病毒颗粒的生产,从而可以有效
转导几乎所有分裂和非分裂细胞类型。
 

服务流程
1) 客户提供:含有目标基因的质粒(提供测序图谱)或所要表达
的目的基因的名称,序列;所需要的病毒滴度及总量,病毒是
否需要纯化;若需要检测外源基因的表达,如需要请提供相应
的抗体
2) 含目的基因的慢病毒载体的构建和纯化提取
3) 慢病毒表达载体、pGag/Pol、pRev、pVSV-G四质粒共转染
293T细胞;
4) 培养48 - 72h,收集培养上清;
5) 病毒的纯化和浓缩(超离和/或超滤);
6) 滴度测定、目的基因检定
7) 将制得的慢病毒液转导客户的靶细胞,筛选混合稳定细胞株,
并检测靶基因的表达。
8) 我们提供:提供重组后的慢病毒载体质粒,并附上对目的基因
的PCR鉴定结果;提供已测定好滴度、可以直接进行后续分
析的慢病毒储存液