快速Pfu DNA聚合酶

中文名称：快速Pfu DNA聚合酶
英文名称：Fast Pfu DNA Polymerase
产品规格：250U
Pfu DNA聚合酶为最常用的高保真DNA聚合酶，在需高保真的PCR反应中广范使用,然而Pfu酶扩增灵敏度不高，延伸速度缓慢（1kb/分钟）给众多的使用者带来了不便。针对普通Pfu酶的扩增缺陷， 采用分子进化技术对普通Pfu酶进行改造，制备的新型聚合酶Fast Pfu酶具有快速、高灵敏度、抗干扰能力强等特点，是新一代的高保真DNA聚合酶。使用Fast Pfu能获得更理想的扩增结果，并大幅度缩短扩增反应时间。

产品组成：

产品特点：
1、高保真：具有同Pfu酶相同的保真度，为普通Taq酶的10倍。
2、快速：Fast Pfu扩增速度为普通Pfu酶的数倍，72℃保温30秒可延伸1kb以上。
3、高效：以λDNA为模板，扩增长度可达12kb，能高效扩增≤6kb片段；对于人基因组DNA等复杂模板，能有效扩增出3kb特定基因片段。
4、高灵敏：可从0.05ng人基因组DNA模板中扩增出1.2kb特定基因片段（图例一）。同样条件下对于基因组DNA的扩增显著优于普通Pfu酶。
5、独特配方的5×Buffer：使PCR扩增反应更加稳定、灵敏、高效。

产品用途：用于要求保真度比较高的PCR反应，包括克隆PCR、DN**段拼接、引入突变、全基因合成、DNA末端补平等。

使用建议：
Fast Pfu DNA聚合酶产生的PCR产物为平滑末端，无3′端"A"突出，除使用BalbRec 一步定向无缝克隆外，其它PCR产物的克隆方案有：
1、PCR前引物进行5′端加磷修饰或将PCR产物磷酸化处理后再直接克隆于平滑末端的载体中。
2、将产物3′末端加A后再与T载体连接。
注意：由于Fast Pfu DNA聚合酶的校对活性可引起引物从3′ 端被部分降解。因此在设计引物时应适当增加引物的长度，理想的引物长度为20-30碱基。另外为了减少由3′→5′ 外切酶活性引起的引物降解，尽量在冰上配制反应体系，并最后加入Fast Pfu酶。

应用实例：

图例一） 50μl扩增体系中，分别以50ng～0.05ng人基因组DNA为模板，可对特定基因片段（1.2kb）进行很好的扩增。
泳道1：50ng；泳道2：5ng；泳道3：0.5ng；泳道4：0.05ng；泳道M：DNA Ladder 2000

质量保证：经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带；PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留，无核酸内、外切酶污染。

活性定义：在74℃条件下，30分钟内催化10nmol dNTP的掺入 反应成为酸不溶性物质所需的酶量为一个单位。

常用反应体系（50μl）

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！