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产品简介：本试剂盒采用碱裂解法裂解细胞，通过吸附柱在高盐状态下特异性地结合溶液中的DNA的特性提取质粒DNA。吸附柱中采用的硅基质材料能高效、专一地吸附DNA，可*大限度去除杂质蛋白质及细胞中其他有机化合物。从50-100ml大肠杆菌LB培养液中，可快速提取200-300μg纯净地高拷贝质粒DNA，提取率达85-90％。使用本试剂盒提取的质粒DNA可适用于各种常规的分子生物学试验，包括酶切、PCR、测序、连接和转化等试验。本试剂盒无需使用酚、氯仿等有毒试剂，操作安全。

产品包装：

试剂盒组成               D1110-10                   储存条件

RNase A                        1ml                          -20℃

溶液Ⅰ                          60ml                           RT

溶液Ⅱ                          60ml                           RT

溶液Ⅲ                          80ml                           RT

漂洗液                          15ml×2                       RT

洗脱液                          30ml                           RT

吸附柱                           10个                           RT

收集管                           10个                           RT

说明书                             1份                           RT

注意事项：

1、溶液Ⅰ在使用前先加入RNaseA(将试剂盒中提供的RNaseA全部加入)，混匀，置于2-8℃保存。

2、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在漂洗液中加入无水乙醇配制成工作液(向15ml的漂洗液中加入60ml的无水乙醇)。

3、使用前请先检查溶液Ⅱ和溶液Ⅲ是否出现混浊，如有混浊现象可在37℃水浴中加热几分钟，待溶液恢复澄清后再使用。

4、溶液Ⅱ、溶液Ⅲ和漂洗液使用后应立即盖紧盖子，如非指明，所有离心步骤均为使用台式离心机室温下进行离心。

5、如果是提取革兰氏阳性菌质粒，必须在裂解细胞前破细胞壁，方法如下：收集适量菌体，加入5ml 溶液Ⅰ ，充分悬浮菌体，加入溶菌酶至终浓度为10-20mg/ml，37℃处理30min左右。加入溶菌酶的浓度和处理时间可根据不同的菌株和具体试验条件进行调整。

6、洗脱缓冲液的体积*好不少于1ml，体积过小会影响回收效率；洗脱液的pH值对洗脱效率也有影响，若需要用水做洗脱液应保证其p H值在8 . 0左右(可用N a O H将水的pH值调至此范围)，pH值低于7.0会降低洗脱效率。 

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相关文献：

《A rapid and efficient one-step site-directed deletion, insertion, and substitution mutagenesis protocol》 作者:Deguang Wu，Xuewu Guo，Jun Lu，Xi Sun，Feng Li，Yefu Chen，Dongguang Xiao 期刊:Analytical Biochemistry 影响因子:2.275 PMID:23256925
《Enhanced freeze tolerance of baker’s yeast by overexpressed trehalose-6-phosphate synthase gene (TPS1) and deleted trehalase genes in frozen dough》 作者:Haigang Tan,Jian Dong,Guanglu Wang,Haiyan Xu,Cuiying Zhang,Dongguang Xiao 期刊:Journal of Industrial Microbiology & Biotechnology 影响因子:2.533 PMID:24951963
《A two-step integration method for seamless gene deletion in baker’s yeast》 作者:Jian Dong，Guanglu Wang，Cuiying Zhang，Haigang Tan，Xi Sun，Mingyue Wu，Dongguang Xiao 期刊:Analytical Biochemistry 影响因子:2.275 PMID:23597844