T4 核酸内切酶 V

产品及特点

本产品既有 DNA 糖基化酶活性，又有 AP 裂解酶活性。16 KD 的蛋白质可识别因紫外线照射引起的 cis-syn 型环丁烷嘧啶二聚体。该酶在嘧啶二聚体的 5′ 端切割糖苷键，同时其内切酶活性切割 AP 位点上的磷酸二酯键。

本产品具体有下列用途：

1. DNA 损伤研究

2. 单细胞凝胶电泳 (彗星实验)

反应条件

1X 反应缓冲液+BSA [25 mM Na2PO4（pH 7.2），100 mM NaCl，1 mMEDTA，1 mM DTT]。加入100 μg/ml BSA，37℃ 温育。

单位定义

1 单位指 20 μl 反应体系中，37℃ 条件下，30 分钟内使超过95% 的 0.5 μg 经紫外线照射诱变的超螺旋pUC19 DNA 变成切刻型质粒的酶量。切刻可通过琼脂糖凝胶电泳来检测。诱变后的质粒 DNA 平均含有 3-5 个嘧啶二聚体。

稀释兼容性

Buffer 成分

10 mM Tris-HCl，100 mM NaCl，0.1 mM DTT，0.1 mM EDTA，50%Glycerol，pH 7.5 @ 25℃

备注

温育时间应不超过 30 分钟，以取得最佳使用效果。