Tma 核酸内切酶 III

产品及特点

该酶为 E. coli 核酸内切酶 III (Nth) 的热稳定同源蛋白。既有 N-糖基化酶活性也有 AP-裂解酶活性。N-糖基化酶活性可释放双链 DNA 上受损的嘧啶碱基，产生一个脱嘧啶 (AP) 位点。AP-裂解酶活性随后对该位点进行切割。Tma 核酸内切酶 III 识别 DNA 上的无碱基位点、5,6二羟基胸腺嘧啶和胸腺嘧啶乙二醇。其反应示意图如下：

具体有下列特点：

1. 碱性析出

2. 碱解旋

反应条件

1 X 反应缓冲液 [10 mM KCl，20 mM Tris-HCl，10 mM (NH4)2SO4，

2 mM MgSO4，0.1% Trition X-100（pH 8.8 @ 25℃）]，65℃ 温育。

单位定义

1 单位指在 10 μl 缓冲液体系中，65℃ 条件下，1 小时内能够切割 1 pmol 含一个 AP 位点*的 60 bp 寡核苷酸双链所需要的酶量。 AP 位点的创建方法如下：37℃条件下，用 1 单位尿嘧啶-DNA 糖基化酶 (UDG)处理 10 pmol 含单一尿嘧啶碱基的60 bp 寡核苷酸双链 2 分钟。

Buffer 成分

10 mM Tris-HCl，100 mM KCl，1 mM DTT，0.1 mM EDTA，50%Glycerol，0.1% Triton X-100，pH 7.4 @ 25℃

参考文献

(1) Nelson, K.E. et al. （1999） Nature, 399, 323–329.

(2) Marks, K. unpublished observations.

(3) Pflaum, M. et al.（1998） Free Rad. Res. 29, 585–594

(4) Hartwig, A. et al. （1996）Toxicology Letters 88, 85–90.