质粒小量提取试剂盒

中文名称：质粒小量提取试剂盒
英文名称：Plasmid small quantity extraction kit
产品规格：100T
本试剂盒采用了一种新型的离子交换柱，在特定条件下，使质粒能在离心过柱的瞬间结合到质粒纯化柱上，在一定条件下又能将质粒充分洗脱，从而实现质粒的快速纯化。该质粒提取试剂盒采用改进的质粒抽提系统，彻底解决了RNA污染的问题。新型的离子交换柱具有高达40μg的结合能力，每个纯化柱可用于抽提1-5ml LB培养过夜的大肠杆菌菌液，抽提所得的质粒的OD值一般在1.80左右。 由本试剂盒抽提所得的质粒可直接用于转化、DNA测序、PCR、基于PCR的突变、体外转录、酶切等。

产品组成：

保存条件：室温避光保存，有效期2年。(RNase A置于-20℃保存)

操作方法：

1．取过夜培养的菌液 1.8ml 加入到 2ml EP管中，13000rpm 室温离心1分钟 后收集细菌沉淀。倒掉上清液，可再次加入菌液 1.8ml，离心后去除上清液。
2．每管加入250μl Buffer A（确认已经加入RNase A），用吸头吹打沉淀菌体至无可见细菌团块，以确保沉淀完全散开。
3．每管加入250μl Buffer B，轻轻颠倒离心管 4～6 次，室温放置 2 分钟，使细菌完全裂解，溶液应变的透明。切勿剧烈振荡，否则会导致基因组DNA 断裂，从而导致所得质粒被基因组DNA 污染。
4．每管加入350μl Buffer C，随即颠倒离心管 4～6 次混匀(切勿剧烈振荡)，可见白色絮状物产生，室温静置 1分钟。
5．手腕用力上下振荡 4～6 次，使白色絮状物振散，然后置于离心机上 13000rpm 室温离心10分钟。
6．将上一步骤离心后的上清倒入或吸入到质粒纯化柱内，13000rpm离心30s，倒弃收集管内液体。(切勿吸入白色沉淀，否则会堵塞离心柱)。
7．在质粒纯化柱内加入500μl Washing Buffer(务必确认已加入无水乙醇)，13000rpm 室温离心30s，洗去杂质，倒弃收集管内液体。
8．重复步骤7 一次。
9．将吸附柱重新放入套管中，13000rpm 室温空离心2分钟。
10．将质粒纯化柱置于新的1.5ml离心管上，静置 2分钟，使痕量乙醇完全挥发，加入80-120μl Elution Buffer 至管内柱面上，放置 1分钟。Elution Buffer 使用前最好 50℃ 水浴预热。
11．13000rpm 室温离心2分钟，所得液体即为高纯度质粒。 

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！