产品内容：
    试剂一：异丙醇50mL（自备）。
TC 工作液：液体50mL×1 瓶，4℃保存。
TC 标准品：液体1mL×1 支，5μmol/mL，4℃保存。
 
产品说明：
   TC 包括游离胆固醇和胆固醇酯。TC 是指组织中所有脂蛋白所含胆固醇之总和。利用酯酶催化胆固醇酯水解生成游离胆固醇（FC）和游离脂肪酸（FFA），从而把胆固醇酯转化为FC；进一步利用胆固醇氧化酶催化FC 氧化，生成△4-胆甾烯酮和H2O2；最后利用过氧化物酶催化H2O2 氧化4-氨基安替比林和酚，生成红色醌类化合物；在500nm 有特征吸收峰，其颜色深浅与TC 含量成正比。
 
自备仪器和用品：
可见分光光度计、可调式移液枪、1mL 玻璃比色皿、异丙醇和蒸馏水。
 
操作步骤：
一、 TC 的提取：
1、 组织中TC 的提取：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10 的比例（建议称取约0.1g 组织，加入1mL 试剂一）进行冰浴匀浆，8000g 4℃离心10min，取上清，即TC待测液。
2、 细胞、细菌中TC 的提取：先收集400-500 万细胞或细菌到离心管内，弃上清，加1mL试剂一，超声波破碎1min（强度20％，超声2s，停1s），8000g 4℃离心10min，取上清，即TC 待测液。
3、 血清（浆）等样品：直接测定。
二、 测定操作：
1. 分光光度计预热30 min，调节波长到500 nm，蒸馏水调零。
2. TC 工作液置于37℃水浴30min。
3. 标准管：在1mL 玻璃比色皿中依次加入20 μL TC 标准品和980μLTC 工作液，迅速混匀，5min 后于500nm 处比色，记为A 标准管。
4. 测定管：在1mL 玻璃比色皿中依次加入20 μL TC 待测液和980μLTC 工作液，迅速混匀，5min 后于500nm 处比色，记为A 测定管。
注意：标准管只需测定一次。
三、 计算公式：
1. 血清（浆）中TC 含量：
TC（μ mol /dL）= C 标准液×A 测定管÷A 标准管×100 mL
= 500×A 测定管÷A 标准管
C 标准液：5μmol/mL；100 mL：1dL=100 mL。
2. 组织中TC 含量：
(1)按样本蛋白浓度计算
TC（μ mol/mg prot）= C 标准液×A 测定管÷A 标准管÷Cpr
= 5×A 测定管÷A 标准管÷Cpr
(2)按样本质量计算
TC（μ mol / g）= C 标准液×A 测定管÷A 标准管÷W
= 5×A 测定管÷A 标准管÷W
C 标准液：5μmol/mL；样本蛋白浓度，mg/mL；W：样本质量，g/mL
3. 细胞、细菌中TC 含量：
TC（μ mol /104 cell）= C 标准液×A 测定管÷A 标准管÷细菌或细胞（104 cell /L）
= 5×A 测定管÷A 标准管÷细菌或细胞（104 cell /L）
C 标准液：5μmol/mL。
注意事项：
最低检出限为1mmol/L。

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