WB,IP,coIP,CHIP细胞组织通用裂解液
产品名称： WB,IP,coIP,CHIP细胞组织通用裂解液
英文名称： lysis buffer
产品编号： F04
产品价格： 0
产品产地： shanghai china
品牌商标： willget
更新时间： 2023-09-20T14:20:30
使用范围： null
上海文渊阁生物科技有限公司
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IP,coIP,CHIP细胞组织通用裂解液
本产品包含包含20mM Tris(pH7.5)，150mM NaCl，1% Triton X-100，0.5% Sodium deoxycholate，以及AEBSF,sodium pyrophosphate，β-glycerophosphate，EDTA，Na3VO4，leupeptin等八种抑制剂及抑菌剂。其中AEBSF为PMSF的稳定及安全替代品。您无需添加PMSF。其裂解产物适合coIP，IP，CHIP实验。产品本身可室温保存，而裂解后的样品建议低温保存。
其裂解的样品可不使用传统BCA法，而通过文渊阁的抗干扰5分钟蛋白定量试剂盒，一步操作，5分钟获得精准定量。
产品组分及保存：
细胞组织通用裂解液 100ml
室温或低温保存皆可，一年有效。
使用说明：
A,对于培养细胞样品：
1. 对于贴壁细胞：去除培养液，用PBS洗一遍。按照6孔板每孔加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。冰浴15分钟使细胞更充分裂解。
对于悬浮细胞：离心收集细胞。按照6孔板每孔细胞加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。冰浴15分钟使细胞更充分裂解。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。
2. 充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
B,对于组织样品：
1. 把组织剪切成细小的碎片。
2. 按照每20毫克组织加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。)
3. 用玻璃匀浆器匀浆（或使用文渊阁开发的手持式电动组织匀浆机匀浆），直至充分裂解。
4. 充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
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