葡萄糖氧化酶测定试剂盒
产品名称: 葡萄糖氧化酶测定试剂盒
英文名称: Glucose oxidase (GOD) Assay Kit
产品编号: BC0690
产品价格: 0
产品产地: 北京市通州区马驹桥联东U谷85A三
品牌商标: Solarbio
更新时间: 2023-08-11T10:26:26
使用范围: null
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试剂组成:
提取液:液体 60mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 40mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 8mL×1 瓶,4℃保存;
试剂三:液体 2mL×1 支,4℃保存;
产品说明:
GOD(EC1.1.3.4)广泛存在于动物、和植物中,催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸,并产生 H2O2, 是生物体中产生活性氧的代谢途径之一。 GOD 催化产生 H2O2,过氧化物酶在有氧存在时催化 H2O2分解产生的氧又将邻联茴香胺氧化生 成有色物质,颜色深浅与葡萄糖氧化酶活性成线性关系。
试验中所需的仪器和设备
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水
样品测定的准备:
组织处理:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加 入 1mL 提取液),进行冰浴匀浆。8000g4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。 血清(浆):直接检测。
测定步骤:
1、分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 500nm,蒸馏水调零。
2、GOD 检测工作液的配制:用时将试剂二和试剂三转移至试剂一中,充分混匀,待用;用不完的 试剂 4℃可保存一周;
3、测定前将 GOD 检测工作液在 37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)水浴 10min 以上。
4、在 1mL 玻璃比色皿中加入 40μL 样本和 960μL 工作液,立即混匀并计时,记录 500nm 下 20s 吸 光值 A1 和 1min20s 后的吸光值 A2。计算ΔA=A2-A1。
GOD 活力单位的计算
1、 血清(浆)GOD 活力的计算
单位定义:每 mL 血清(浆)每分钟催化产生 1nmol 氧化型邻联茴香胺为一个酶活力单位。 GOD(U/mL)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×109]÷V 样÷T=3333×ΔA
2、动物组织 GOD 活力的计算
(1) 按蛋白浓度计算
单位定义:每 mg 组织蛋白每分钟催化产生 1nmol 氧化型邻联茴香胺为一个酶活力单位。
GOD(U/mgprot)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×109]÷(V 样×Cpr)÷T=3333×ΔA÷Cpr
(2) 按样本鲜重计算
单位定义:每 g 组织每分钟催化产生 1nmol 氧化型邻联茴香胺为一个酶活力单位。
GOD(U/g 鲜重)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×109]÷(W×V 样÷V 样总)÷T=3333×ΔA÷W
V 反总:反应体系总体积,1×10-3 L;ε:氧化型邻联茴香胺摩尔消光系数,7.5×103 L/mol/cm; d:比色皿光径,1cm;V 样:加入样本体积,0.04mL;V 样总:加入提取液体积,1mL;T:反应 时间,1min; Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g。
相关文献:
《Cloning, deletion, and overexpression of a glucose oxidase gene in Aureobasidium sp. P6 for Ca2+-gluconic acid overproduction》 作者:Yan Ma1 & Zhe Chi1 & Yan-Feng Li1 & Hong Jiang1 & Guang-Lei Liu1 & Zhong Hu2 & Zhen-Ming Chi 期刊:Annals of Microbiology 影响因子:1.431 PMID:
《Effects of validamycin in controlling Fusarium head blight caused by Fusarium graminearum: Inhibition of DON biosynthesis and induction of host resistance》 作者:JingLiaYabingDuanabChuanhongBianaXiayanPanaChengjieYaoaJianxinWangabMingguoZhou 期刊:Pesticide Biochemistry and Physiology 影响因子:2.87 PMID:30744889