iStop基因敲除技术产品-载体及构建-试剂-生物在线
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iStop基因敲除技术产品

iStop基因敲除技术产品

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产品名称: iStop基因敲除技术产品

英文名称: iStop gene knockout technology products

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产品产地: 重庆

品牌商标: inovogen

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iStop基因敲除技术产品

 

 

    iStop技术基于CRISPR单碱基基因突变技术CBE(CRISPR-dependent cytosine base editor)(1)。CBE技术在不依赖DNA双链断裂的前提下,特异性实现基因组C>T碱基突变,将CBE技术应用于基因敲除时,可以实现精确地将四个密码子(CAA、CAG、CGA 和 TGG)转换为终止密码子(TAA、TAG、TGA)(图1)。

    目前主要的CRISPRCas9基因敲除方法主要有邻端连接法(NHEJ)和重组修复法(HR)两种。二者均依赖Cas9蛋白切割造成基因组DNA双链断裂后的修复反应。而DNA双链断裂是严重的DNA损伤,激活DNA损伤检测,导致细胞死亡。Cas9蛋白的非特异切割也会引起基因组非靶点位置的双链断裂,从而导致非特异性的DN**段丢失。iStop基因敲除不会产生DNA双链断裂,避免了产生激烈的DNA损伤应激,基因敲除过程温和可控。


定点突变基因敲除细胞株优点:

    1)敲除过程中不引起DNA双链断裂,不会引起细胞应激导致状态改变或者大片段DNA缺失等不可控突变。

    2)对细胞的干扰最小。细胞遗传背景清晰。

    3)不残留抗性基因等筛选标签。

     

    1、iStop基因敲除CRISPRCBEmax载体
    CRISPRCBEmax载体表达Cas9单链切割突变体和CBE酶,实现细胞基因组定点C>T突变。需配合sgRNA表达载体使用。

    CR3200-1 pCBE4max-Cas9nick(2A)puro
    CR3200-2 pCBE4max-Cas9nick-spG(2A)puro
    CR3200-3 pCBE4max-Cas9nick-spRY(2A)puro

     

     

    2、sgRNA表达载体
    经过细胞基因敲除实验验证的iStop基因基因敲除载体。具体请咨询客服。

     

     

    3、iStop基因敲除细胞株

    经过基因组PCR测序或者测序+WB验证的iStop基因敲除细胞株。

    货号
    名称
    敲除基因ID
    细胞
    敲除方法
    验证
    CR3220-1
    29126
    HEK293V
    iStop
    测序
    CR3220-2
    29126
    MDA-MB-231
    iStop
    测序