飞克级超敏ECL发光液
产品名称： 飞克级超敏ECL发光液
英文名称： ECL
产品编号： F03
产品价格： 0
产品产地： 上海
品牌商标： willget
更新时间： 2023-09-20T14:16
使用范围： null
上海文渊阁生物科技有限公司
- 联系人 : 赵经理
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服务编号：F03
名称：飞克级超敏ECL发光液
规格： 100ml
价格： 280 元
超敏ECL发光液
在western实验中，检测灵敏度是很重要的参数，而发光底物的发光效率很大程度的决定了western检测灵敏度，文渊阁开发的此超敏ECL发光液，作为HRP的底物，其发光效率高于Pierce SuperSignal West Dura的发光液16倍。可检测最低值15飞克抗原。并且其本底发光远低于Pierce SuperSignal West Dura和Millipore immobilon ECL，本发光液支持长时间曝光。另外，本产品稳定性高支持室温存放。
包装规格：
A液 50ml B液 50ml 4℃或室温保存，室温一年，4℃两年有效。
使用说明：
1. 超敏ECL发光液工作液的配制：等体积混合适量A液和B液，室温放置备用。工作液宜在临检测前配制。
2. Western二抗孵育后，并进行数次洗涤后，用平头镊将膜取出，然后置于一洁净保鲜膜或本公司配赠的曝光夹膜上。
3. 根据膜的大小，按每10平方厘米膜加0.5ml 工作液，滴加工作液到膜上，确保使工作液均匀覆盖在膜上。
4. 取膜，弃工作液，将膜放在两片保鲜膜中间或本公司配赠的曝光夹膜内，随后进行压片检测或荧光成像仪检测。
5. 压片检测：将膜固定于片夹内。暗室内压片10秒-10分钟，立即显影定影，根据结果再调整压片时间。或直接取3张X光片叠加在一起进行曝光，然后一起显影定影观察结果。
6. 荧光成像仪检测：将膜放置到荧光成像仪内，参考仪器说明书进行检测。
1. 超敏ECL发光液工作液的配制：等体积混合适量A液和B液，室温放置备用。工作液宜在临检测前配制。
2. Western二抗孵育后，并进行数次洗涤后，用平头镊将膜取出，然后置于一洁净保鲜膜或本公司配赠的曝光夹膜上。
3. 根据膜的大小，按每10平方厘米膜加0.5ml 工作液，滴加工作液到膜上，确保使工作液均匀覆盖在膜上。
4. 取膜，弃工作液，将膜放在两片保鲜膜中间或本公司配赠的曝光夹膜内，随后进行压片检测或荧光成像仪检测。
5. 压片检测：将膜固定于片夹内。暗室内压片10秒-10分钟，立即显影定影，根据结果再调整压片时间。或直接取3张X光片叠加在一起进行曝光，然后一起显影定影观察结果。
6. 荧光成像仪检测：将膜放置到荧光成像仪内，参考仪器说明书进行检测。
注意事项：
1， A液和B液在吸取过程中必须要更换枪头，A液和B液相互污染后会导致A液或B液逐渐失效，影响后续的使用效果。
2， 部分塑料材料或染料具有荧光淬灭的副作用，保鲜膜为食品级PP材料，不产生荧光淬灭的效应，但保鲜膜太柔软易褶皱，操作麻烦，并易造成背景因褶皱产生的不均匀，推荐客户使用文渊阁曝光夹膜进行western曝光操作，此膜双层硬质高透光（透光率高于97%），荧光不淬灭，不会褶皱，信号更均匀，操作简单，价格仅2元。
3， 由于本发光液灵敏度高，一抗和二抗浓度大时易造成高背景，推荐使用文渊阁低背景封闭及抗体增敏稀释液，可有效降低背景。二抗浓度直接决定背景深度，羊抗兔羊抗鼠HRP二抗，若使用文渊阁的产品，统一1:10000和1:5000，其他品牌二抗须由客户测试后确定。若客户需要将膜上抗体剥离掉进行其他抗原检测，此时务必使用文渊阁开发的膜上抗体高效剥离液，其他品牌的剥离液经文渊阁内部检测，基本都不可以去除膜上残余信号，并且大多伤害膜上抗原。
附：
一，不同品牌发光液发光时间及灵敏性测试：
将本公司羊抗兔二抗（0.5mg/ml)用PBS稀释20000倍后，4倍倍比稀释9次，各取1.5ul点于NC膜上（PALL,0.22um)，室温放置10min后，加入不同品牌发光底物，其中1为文渊阁本产品，2为millipore immobilon ECL,3为pierce SuperSignal West Dura, 4为pierce ECL底物。通过即刻曝光10秒和50秒来比较不同发光液灵敏性，之后将此含有发光底物的膜静置50分钟后再次检测，以比较不同发光液的发光持续时间，检测设备为制冷CCD（2x2像素合并）。
结果表明，文渊阁超敏发光液检测灵敏度远高于其他国际著名品牌（其中高于pierce ECL 16倍），并且支持长时间曝光，而millipore immobilon ECL和pierce ECL会随时间快速衰减，pierce SuperSignal West Dura也可比较持久发光，但灵敏度低于文渊阁本产品4倍。
欢迎广大客户一起重复此简单实验，不仅可掌控本实验室发光液质量，也可质控二抗质量。
