蛋白表达纯化/多肽合成/多肽标记

蛋白质表达纯化

随着蛋白药物市场的快速发展和蛋白质组学研究的深入，高纯度活性蛋白的需求越来越大。威斯腾生物中心组建了一支由多名具深厚生物技术基础与制药企业工作经验的留学归国人员和国内专家为核心的团队。可为国内外客户提供从基因到蛋白纯化的整套技术服务。

威斯腾服务特色

稳定而多样的表达系统：威斯腾生物已建立整套的基因克隆与表达体系，无论是单个基因的克隆、表达与纯化，还是多个基因高通量的基因克隆、表达和纯化，均能选用适合您试验（科研项目）需要的表达系统和合适的表达载体为您提供优质的服务。

多种纯化方式：可为客户提供多种蛋白纯化服务，纯化方式包括亲和层析纯化、凝胶过滤、离子交换、疏水层析等，客户可根据需要选择合适的纯化方式。

专业的团队和良好的信息管理体系：专业的基因克隆、蛋白表达与纯化技术人员与团队，具有丰富的表达和纯化经验，可为客户解决各种瓶颈问题, 良好信息管理体系使我们能够为客户提供成熟、高效的基因克隆服务。

操作流程

大肠杆菌和酵母蛋白表达系统：

合成基因（另外收费）或者客户提供

SDS-PAGE检测表达

Western blot检测表达（可选）模板(cDNA、基因组DNA、质粒等)

构建表达载体

筛选阳性克隆

表达优化和可溶性分析

提供结果

１、构建的表达载体及测序报告

２、SDS-PAGE结果

３、筛选的表达菌株

４、Western blot结果

５、实验流程及结果

６、2ml 1.0×108pfu/ml的病毒（利用昆虫杆状病毒蛋白表达系统表达时）

稳定表达细胞株（哺乳动物细胞）

多肽合成

威斯腾生物合成多肽采用逐步固相合成方法服务，利用微波技术处理反应体系，可以合成较长的复杂多肽。多肽合成是一个重复添加氨基酸的过程，多肽的一个末端固定在特殊支持物上，通过循环步骤最终形成一条完整的多肽。

肽链的设计：

多肽是复杂的大分子，每条序列在物理和化学特性上都是独特的，研究人员设计多肽时应考虑到合成，纯化以及溶解等过程中的难度，从而能够使用该多肽达到自己的实验目的。

如何降低肽链合成的难度：

减少序列长度

减少疏水性残基数

减少困难残基

如何增强肽链的可溶性：

改变N端或C端

缩短或加长序列

加入可溶性残基

通过置换一个或多个残基改变序列

通过选用不同框架来改变序列

多肽保存：

冻干多肽可在-20度保存或室温保存  

溶液肽远比冻干形式不稳定，溶液应为中性PH（5-7）-20度保存。  

为避免样品的反复冻融，最好分成小样存放。

多肽的溶解：

大多数多肽的首选溶剂是超纯抽气水，稀乙酸或氨水分别对碱性或酸性多肽的溶解也有帮助。如果这些方法用过后还不溶解的多肽，建议用DMF，脲，guanidiniam,chloride,acetonitnle来溶解。

多肽的用途：

主要用于抗体的制备，多肽疫苗，多肽微注射剂对基因结构与功能关系的研究。本中心提供不同纯度的多肽，多粗提产物到98%的医药级别，客户可根据需求进行选择。

＞80% ：免疫学应用，多克隆抗体制备

＞90%：SAR研究，生物测定

＞95%：NMR，结晶化，体外生物测定

＞98%：NMR，结晶化，敏感的生物测定

服务范围：

1）普通线性肽，链长至189个氨基酸，毫克至克级，纯度可达99%
2）简单修饰肽：免费提供N端乙酰化，末端酰胺化
3）复杂修饰肽：脂肽，***酸肽（Ser、Thr、Tyr），环肽（酰胺环、二硫键环），荧光标记肽（FAM、FITC），生物素标记肽（BIOTIN）、复合抗原肽（MAP）等 ┄
4）蛋白交联：KLH，BSA，OVA
5）含特殊氨基酸肽：含有D型氨基酸及各种氨基酸衍生物
6）不同纯度范围（粗肽、＞70%、＞80%、＞90%、＞95%、＞98%、＞99%）

多肽标记

提供同位素、荧光标记、生物素标记

威斯腾实验服务流程

威斯腾生物服务项目