产品内容：
提取液：液体60mL× 1 瓶，4℃保存；   
试剂一：液体30mL× 1 瓶，4℃保存； 
试剂二：粉剂× 1 瓶，4℃保存； 临用前加入30mL蒸馏水充分溶解备用；用不完的试剂4℃保存一周；
试剂三：液体5 mL× 1 瓶，4℃保存； 
试剂四：粉剂×1支，- 20℃保存，用时每支加4mL双蒸水充分溶解备用，用不完的试剂4℃保存一周；
试剂五：粉剂×1支，- 20℃保存；用时每支加2mL 双蒸水充分溶解备用，用不完的试剂4℃保存一周；
试剂六：粉剂×1支，-20℃保存；用时每支加250μL试剂一和250μL蒸馏水充分溶解备用，用不完的试剂4℃保存一周；
产品说明：
HK广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是葡萄糖分解过程中的第一个关键酶，催化葡萄糖转化为6-磷酸葡萄糖，6-磷酸葡萄糖是糖酵解和磷酸戊糖途径的交叉点。
HK催化葡萄糖合成6-磷酸葡萄糖，6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步催化6-磷酸葡萄糖脱氢生成NADPH ，NADPH 在340nm有特征吸收峰。
试验中所需的仪器和试剂：
紫外分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL 石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤：	
一、样品测定的准备：   
1. 细菌或培养细胞：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500-1000:1 的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2. 组织：按照组织质量（g）：提取液体积（mL）为1:5-10 的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
3. 血清（浆）样品：直接检测。
二、测定操作：
1. 分光光度计预热30min以上，调节波长至340nm，蒸馏水调零。
2. 将试剂一、二、三、四和五置于37℃（哺乳动物）或25℃（其他物种）预热10min。
3. 加样表
试剂名称(μL)
测定管
试剂一
400
试剂二
400
试剂三
80
试剂四
80
试剂五
40
试剂六
8
样本
30
将上述试剂按顺序加入1mL 石英比色皿中，立即混匀，加样本的同时开始计时，在340nm波长下记录20秒时的初始吸光度A1，比色后迅速将比色皿连同反应液一起放入37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）水浴或恒温箱中，准确反应5分钟；迅速取出比色皿并擦干，340 nm下比色，记录5分20秒时的吸光度A2，计算ΔA=A2-A1。
注意事项： 
1. 如果一次性测定样本数较多，可将试剂一、二、三、四、五、六按比例配成混合液，预热10min。
2. 比色皿中反应液的温度必须保持37℃或25℃，取小烧杯一只装入一定量的37℃或25℃蒸馏水，将此烧杯放入37℃或25℃水浴锅中。在反应过程中把比色皿连同反应液放在此烧杯中。
3. 最好两个人同时做此实验，一个人比色，一个人计时，以保证实验结果的准确性。 
4. 不同匀浆组织中HK 活力不一样，做正式试验之前请做1- 2 只预试，若ΔA> 0.5，则说明组织活力太高，必须用提取液稀释成适当浓度匀浆上清液（计算公式中乘以相应稀释倍数），或缩短反应时间至2min，使ΔA< 0.5，以提高检测灵敏度。 
HK活性计算：   
1、 血清（浆）HK活力的计算：
单位的定义：每毫升血清（浆）在每分钟生成1nmol NADPH定义为一个酶活力单位。 
HK（U/mL）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷V样÷T=1113×ΔA
2、 组织、细菌或细胞中HK活力计算：
（1） 按样本蛋白浓度计算：
单位的定义：每mg组织蛋白每分钟生成1nmol NADPH定义为一个酶活力单位。
HK（U/mg prot）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1113×ΔA÷Cpr
（2） 按样本鲜重计算
单位的定义：每g组织每分钟生成1nmol NADPH定义为一个酶活力单位。TUNEology 波长可调检测卡盒-->