HYQ凝胶回收/PCR产物纯化试剂盒
产品名称: HYQ凝胶回收/PCR产物纯化试剂盒
英文名称: HYQspin Gel/PCR Pure Kit
产品编号: HG301
产品价格: 0
产品产地: 美国
品牌商标: HYQ
更新时间: null
使用范围: null
- 联系人 :
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操作步骤:
建议跑电泳凝胶回收时使用新鲜的 TAE buffer 。反复使用的电泳缓冲液会导致PH值升高减少回收量。
1. 向离心柱中加入500 µL Buffer BS, 12,000 rpm离心30s。
*此步骤为可选步骤,一般情况下,省略此步骤也能得到理想的回收效果。但当吸附柱存放时间较长时,可能出现吸附能力下降的现象,通过使用Buffer BS,可以使DNA吸附柱恢复最佳的吸附能力。
2.将含DN**段的琼脂糖凝胶切下,转至1.5 mL离心管中, 加入 400µL* of Buffer GS到含胶的1.5 mL离心管中**,在60℃下温浴8分钟左右,且每隔2分种轻弹试管底部,直至胶溶解完全,放置使其冷却至室温。
*本试剂盒的溶胶液GS采用的先进的配方,最高可以1:1的比例溶解琼脂糖凝胶。400µL Buffer GS通常是足量的,但当凝胶体积过大导致不能溶解时,请适量增加GS的用量。
**若DN**段小于200 bp,请加入200ul的异丙醇。
3. 转移DNA/ Buffer GS 混合溶液至离心柱中,室温静置1min,12000rpm 离心30s,弃废液,将吸附柱放回收集管中。
4. 加入600 µL Buffer DWS (确保已加入无水乙醇),室温静置1min,12000rpm 离心30s,弃废液,将吸附柱放回收集管中。
5. 再次加入600 µL Buffer DWS ,12000rpm 离心30s,室温静置1min,弃废液,将吸附柱放回收集管中。
6.12000rpm离心2min,以去除吸附柱中残余的乙醇。
*此步骤中开盖离心将会更有效的去除残留的乙醇。
7.将吸附柱放入干净的1.5 mL离心管中,向柱中心加入30-50 µL Buffer ES。室温静置1min,12000rpm离心1min洗脱DNA。
*将Buffer ES预热到60 ℃,或加入Buffer ES后将柱子整个温育5分钟后再离心洗脱可以增加DNA回收效率。
*对大于8kb的片段,加入Buffer ES后将柱子整个温育15分钟后再离心洗脱可以提高回收效率。
*第一次洗脱可以回收离心柱DNA结合量的 60-70% ,将洗脱液重新上柱可以回收额外 20% ,两次洗脱总回收量可达90%。
http://www.hyqbio.com.cn/index.php?case=archive&act=show&aid=34