探针法荧光定量PCR Mix (2X)
产品名称: 探针法荧光定量PCR Mix (2X)
英文名称: Probe qPCR Mix (2X)
产品编号: SR31042
产品价格: null
产品产地: 浙江杭州
品牌商标: GenMedx
更新时间: 2024-01-15T13:14:54
使用范围: null
规格 | 价格 |
1.25 ml | 150.0 |
5 ml | 550.0 |
杭州格巨医学科技有限公司
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检测原理:探针法qPCR不使用荧光染料如SYBR Green等对PCR产物进行荧光染色,而是采用了荧光基团和淬灭基团(quencher)标记的DNA探针靶向拟通过PCR检测的目标序列(设计的探针结合位点通常位于两条引物结合位点之间)。正常情况下,探针上的淬灭基团由于空间上的荧光共振能力转移(FRET)而导致荧光基团淬灭。在PCR反应扩增目标序列时,引物和探针都会退火到目标基因上,随着引物的延伸,Taq酶的5'→3'外切酶活性会导致结合在目标序列上的探针从5’端开始逐渐被降解。探针的荧光基团和淬灭基团被Taq酶切开后,淬灭基团的作用消失,荧光基团就能正常地被激发光所激发而产生荧光了。每经过一个PCR循环,就会有更多的荧光基团被释放,荧光强度与新合成的目标片段数量成正比,从而就可以实现定量检测了。探针通常是目标序列特异性的一段线性DNA,5'端标记FAM或HEX等荧光基团,3'端标记BHQ1、TAMRA或MGB等荧光淬灭基团。
本产品的特异性好、灵敏度高:特异性并不仅仅依赖于PCR引物,还依赖于探针的特异性,探针和目标基因发生特异性的结合和降解,才能生成荧光信号,检测灵敏度和特异性通常要显著高于使用SYBR Green等荧光染料的方法。
本产品可用于多重检测:单个反应孔中,不同基因对应不同探针,不同探针对应不同荧光标记,即可进行多重荧光定量PCR检测。经测试,在适当优化引物和探针后,本产品可同时用于2-4个基因的检测。