根据客户要求检测sgRNA的活性及敲除效率，客户可以选购我公司Precut pSG-  target Cloning kit自行构建报告载体用于检测，我公司提供阳性及阴性sgRNA及其SSA report target质粒。

• 检测原理：

    SSA报告质粒(pSG-target)中luciferase基因被终止密码子提前终止，这种截短的luciferase没有活性。为检测sgRNA的剪切活性，将Cas9/sgRNA的靶点序列插入到终止密码子之后。在Cas9和sgRNA的作用下，靶点位置的序列被有效剪切形成DSB，细胞通过同源重组重新形成有活性的luciferase，通过检测luciferase的活性升高就可以反应Cas9/sgRNA的剪切活性。

•  Cas9/ gRNA will bind at the target site and create a double-strand break(DSB). The break will be efficiently repaired by the SSA pathway to reconstruct an active firefly luciferase reporter gene.