预制胶自制试剂盒
产品名称: 预制胶自制试剂盒
英文名称: self-made precast gel kit
产品编号: P11
产品价格: 0
产品产地: shanghai china
品牌商标: willget
更新时间: 2023-09-20T14:20:30
使用范围: null
上海文渊阁生物科技有限公司
- 联系人 : 赵经理
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任意规格预制胶自制试剂盒
文渊阁的预制胶目前均是10cmX8cm尺寸(与美国BIORAD公司mini预制胶尺寸一致),12孔,1mm凝胶,如果您需要高分辨率,可长久保存的其他规格(厚度,孔数,尺寸)的SDS-PAGE凝胶,您只需要用手边的玻璃板,按照原有的配胶方法进行,只是将其缓冲液成分换成本预制胶制备缓冲液即可。
文渊阁的预制胶缓冲液,与传统的TRIS缓冲液不同,传统缓冲液分离胶为PH8.8的TRIS-HCL溶液,而浓缩胶为PH6.8的TRIS-HCL溶液,而聚丙烯酰胺在碱性环境下会逐步水解为聚丙烯酸,此聚合物带负电荷,所以会影响电泳。文渊阁的预制胶缓冲液为中性PH,并加入稳定剂,这样聚丙烯酰胺稳定性大大增强,用此缓冲液配置的预制胶在室温条件下可放置一年。电泳及转膜缓冲液兼容传统tris-glycine缓冲液,电泳转膜操作与传统操作一致。
试剂盒组分:
10ⅹ预制胶缓冲液 100ml
50%丙烯酰胺溶液 50ml (丙烯酰胺与甲叉丙烯酰胺的比例29:1,含1x预制胶缓冲液)
过硫酸铵干粉 10ml管
TEMED 800ul
Mini型预制胶包装袋 100张
本试剂盒支持室温运输,长期保存需置客户需置4°C,保存期1年。
使用说明:
A,分离胶液及浓缩胶液及过硫酸铵溶液配制
1,将10x预制胶缓冲液全部倒入1000ml试剂瓶中,加入900ml去离子水,配制成1x预制胶缓冲液的工作液。长期存放需置4°C。
2,在装有过硫酸铵干粉的管中加入10ml去离子水,盖上盖子,上下颠倒溶解10秒钟,即获得过硫酸铵溶液。长期存放需置-20°C。
3,按照以下比例配置分离胶和浓缩胶(以10ml示范,其它体积成比例增减)
15% | 12% | 10% | 8% | 6% | 4%(浓缩胶) | |
50%丙烯酰胺溶液 | 3ml | 2.4ml | 2ml | 1.6ml | 1.2ml | 0.8ml |
1x预制胶缓冲液 | 7ml | 7.6ml | 8ml | 8.4ml | 8.8ml | 9.2ml |
10%过硫酸铵溶液 | 100ul | 100ul | 100ul | 100ul | 100ul | 100ul |
TEMED | 4ul | 4ul | 4ul | 6ul | 8ul | 10ul |
B,预制胶制备
(以制备一块BIO-RAD的mini胶(1mm)为例,其他大小和数量的胶按比例增加相应试剂)
1,将玻璃板固定好,并确定不会漏胶(可先用去离子水装入,检查漏胶情况,如果不漏,将板中去离子水倒掉,残余的的微量水滴不影响制胶操作)。
2,取4ml分离胶液,加入到配胶的玻板之间,并其上层加入0.5ml无水乙醇,静置30-50分钟至胶凝固。倒去上层乙醇。
3,取2ml浓缩胶液,加入两玻璃板之间,加上梳子室温放置30-50分钟至胶凝固。
4,制备好的胶可即刻使用,也可以将制备好的胶连同玻璃板和梳子,装入到本试剂盒自带的mini型预制胶包装袋,厚自封袋,或其他致密性较好的塑料袋中,加入5-8ml的1x预制胶缓冲液的工作液,并用封口机封口(保证水分不外泄),此凝胶可在室温保存一年。
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