selleck产品在文献中的引用：
Mol Ther,2012, 20(5):972-83
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生物活性
产品描述
PF-00562271是PF-562271的苯磺酸盐，是一种有效的，ATP竞争性，可逆的FAK抑制剂，IC50为1.5 nM，作用于Pyk2比作用于FAK效果低10倍左右，比作用于其他蛋白激酶（除了一些CDKs）选择性高100倍以上。Phase 1。
靶点
FAK
Pyk2
 
 
 
 
IC50
1.5 nM
14 nM [1]
 
 
 
 
体外研究
在重组酶实验中, PF-562271选择性抑制FAK 和 Pyk2 酪氨酸激酶活性，IC50分别为1.5 nM 和14 nM。在细胞实验中，PF-562271 作用于FAK的IC50值为5 nM，比作用于其他激酶靶点选择性更高。[1] 在二维培养中，PF-562271 抑制FAK WT,FAK−/− 和FAK 激酶缺乏(KD)的细胞增殖，IC50分别为3.3 μM, 2.08 μM 和 2.01 μM。[2]
体内研究
PF-562271作用于一些人类皮下移植瘤模型，抑制肿瘤生长，这种作用存在剂量依赖性，且产生最大肿瘤抑制效果，按25 到 50 mg/kg剂量作用于PC-3M, BT474, BxPc3, 和LoVo细胞，每天两次，抑制达78%到94%，没有发生体重降低，生病或死亡。[1]PF-562271 按25 mg/kg剂量口服处理皮下和骨转移PC3M-LUC-5233移植瘤模型，显著降低肿瘤进展。[3]
特征
 
推荐的实验操作(此推荐来自于公开的文献所以Selleck并不保证其有效性)
激酶实验: [1]
重组激酶实验和酶动力学
纯化激活的FAK激酶域 (第 410–689位氨基酸)与 50 μM ATP ，和每孔 10 μg Glu 和 Tyr, p(Glu/Tyr)随机肽聚合物,在激酶buffer [50 mM HEPES (pH 7.5), 125 mM NaCl, 和 48 mM MgCl2] 中反应15分钟。使用从1 μM连续稀释的PF-562271 进行p(Glu/Tyr)磷酸化。实验中每种实验浓度重复三次。使用通用 抗磷酸酪氨酸 (PY20) 抗体和随后的辣根过氧化物酶（HRP）标记的羊抗鼠IgG抗体检测p(Glu/Tyr) 的磷酸化。加入HRP 底物，加入终止液(2 M H2SO4)，在450 nm处测定吸光值。使用Hill-Slope 模型测定IC50值。使用KinaseProfiler 选择性筛选服务系统通过UpState生物技术进行广谱激酶选择谱研究。
细胞试验: [2]
细胞系
鳞状细胞癌(SCC)
浓度
0 到1 μM
处理时间
72小时
方法
细胞接种48小时后，加入PF-562271。加入冰冻25% 三氯乙酸 (TCA) 溶液，混合细胞，3天后，使用 Sulforhodamine B(SRB) 染料染色。使用1% 冰醋酸冲洗实验板，烘干，然后再悬浮在10 mM Tris buffer, pH 10.5中，然后在 540 nm处测定吸光值。拟合曲线，使用GraphPad Prism 4 软件从6次重复测定中获得IC50值。
动物实验: [1]
动物模型
PC-3M, BT474, BxPc3, LoVo, U87MG, H125 和H460细胞皮下注射到无胸腺雌性小鼠右侧
配制
PF-562271溶于5% Gelucire
剂量
≤100 mg/kg
给药处理
 
参考文献
[1] Roberts WG, et al. Cancer Res. 2008, 68(6), 1935-1944.
[2] Serrels A, et al. Int J Cancer. 2012, 131(2), 287-297.
[3] Sun H, et al. Cancer Biol Ther. 2010, 10(1), 38-43.
[4] Bagi CM, et al. Cancer Biol Ther. 2009, 8(9), 856-865.